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DNA纯化?蛋白浓缩?安捷伦StrataClean™树脂会出手!
更新时间:2023-06-14      阅读:389

StrataClean™树脂是一种无毒、不可燃的羟基化二氧化硅颗粒浆液,可用于纯化 DNA,或将稀释的蛋白质混合物浓缩。 使用StrataClean™ 树脂纯化DNA无需进行苯酚:氯仿提取(这两种物质剧毒且可燃), 提取的 DNA 可直接用于测序,或沉淀用于连接和限制性酶解等操作。使用StrataClean™树脂纯化浓缩蛋白,不需要像传统的方法那样沉淀、透析和超滤等操作;只需要将树脂加入样品混和并简单离心即可。与StrataClean™树脂结合的即为已经浓缩的蛋白,可以用于下游的SDS-PAGE和二维凝胶电泳。

产品优势:

方法无毒、安全且简单易用

StrataClean 树脂是用于 DNA 纯化的无酚技术。固相硅胶型树脂具有羟基,以与酚羟基相同的方式与蛋白质反应。采用树脂处理可将 DNA 与所有限制性内切酶和某些修饰酶分离。树脂是无毒、不可燃,实验更加安全

实验耗时短

由于 StrataClean 树脂具有与苯酚相似的特性,因此在中性 pH 下对蛋白质具有高亲和力,而对核酸则具有较低亲和力。该树脂的硅胶颗粒为不溶性,蛋白质通过与 StrataClean 树脂结合可在 5 分钟内全提取。无蛋白质的 DNA 可有效用于下游应用,例如克隆、PCR、序列分析和 Southern 印迹分析。


使用方法

DNA纯化(以鼠尾DNA提取为例)

StrataClean™树脂可以代替苯酚:氯仿从鼠尾中纯化小鼠基因组DNA。所得到的DNA适合用于杂交。


实验步骤:

1、准备鼠尾(6mm左右长度)在750μl 1X STE,11% SDS and 25 μl of 10 mg/ml 蛋白酶K ,5555°C 消化三小时,或37°C 过夜消化。

2、消化后,加入30μl StrataClean™树脂,颠倒混匀,然后在离心机中14,000 rpm 离心10分钟。

3、提取上清液,并转移到一个新的试管中。加入750 μl冰异丙醇,倒混合。可以看到一个DNA“毛球"形成。

4、将DNA放在14000rpm的离心机中离心4分钟,吸出上清液,让DNA晾干。

5、用250 μl TE缓冲液(10 mM Tris-HCl;1 mM EDTA,pH 7.8)重悬DNA,以备用


蛋白浓缩(以提取限制性内切酶和改性酶为例)

StrataClean™树脂可以用于提取所有限制性内切酶和一些改性酶。如果样品符合以下规格,则可获得最佳结果:

  • 最大反应体积:250μl

  • 最大(最终)酶浓度10%(vol/vol)

  • 最大盐浓度150 mM

  • 若体积超过250μl,使用10%的StrataClean™树脂

StrataClean™树脂用量,可参考下表

实验步骤:

1.使StrataClean™树脂充分涡旋。

2.使用无酶的枪头,将StrataClean™树脂加入反应体系,涡旋15秒。

3.在室温下孵育1分钟。

4.在2000×g离心1分钟(可以大于1分钟)。

5.使用无酶枪头,小心地将含有DNA清液转移到新的离心管中,请注意不要吸取到底部的StrataClean™树脂

6.重复步骤1-5。

7.使用1X LDS 缓冲液 添加DTT 在95℃从StrataClean™树脂中讲蛋白洗脱备用


高分文献精选:

1.Silwal P, Kim Y J, Lee Y J, et al. Chemical mimetics of the N-degron pathway alleviate systemic inflammation by activating mitophagy and immunometabolic remodeling[J]. Experimental & Molecular Medicine 1-14 (2023)

2.Stidham S, Villareal V, Chellappa V, et al. Aptamer based point of care diagnostic for the detection of food allergens[J]. Scientific Reports 12(1): 1303 (2022).

3.Zhou, H., Stein, C.B., Shafiq, T.A. et al. Rixosomal RNA degradation contributes to silencing of Polycomb target genes. Nature 604, 167–174 (2022).

4.Peng, M., Curry, S.M., Liu, Y. et al. The ex vivo human translaminar autonomous system to study spaceflight associated neuro-ocular syndrome pathogenesis. npj Microgravity 8, 44 (2022).

5.Koch H, Dürwald A, Schweder T, et al. Biphasic cellular adaptations and ecological implications of Alteromonas macleodii degrading a mixture of algal polysaccharides[J]. The ISME journal 13(1): 92-103 (2019).


产品信息:

产品名货号规格
StrataClean resin4007143 ml
4007159 ml

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